C18液相色谱柱出现堵塞之后的处理方法分享

2022-09-13 10:06

  C18液相色谱柱采用高压气动增压原理,选用G系列增压泵,以压缩空气作为气源,其采用单气控非平衡气体分配阀来实现泵的自动往复运动。接液部分采用不锈钢,泵的全套密封件均为进口产品,从而保证了泵的性能。其分离效率则超过硅胶色谱柱,明显的特点之一是基质被烷基化的填料的洗脱顺序,其保留能力与碳链长度成正比。

  C18液相色谱柱是高效液相分离系统的中重要的环节,根据极性分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱,或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质,在其表面键合非极性的十八烷基官能团(ODS)称为C18柱,其它常用的反相柱还C8,C4,C2和苯基柱等。

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  今天咱们要来聊一聊的是当C18液相色谱柱出现堵塞之后的处理方法:

  如果遇到堵塞,先要确定堵塞是由于什么原因引起的,如果是由于柱中残留的缓冲盐引起的,这是轻微的堵塞了,可以尝试用高比例的水相在较高的温度下冲洗。

  如果是由于样品原因导致堵塞,又要考虑另外的办法,如果是样品中含有太多吸附性很强的物质(有时是复杂样品中的某些杂质,无法通过过滤离心等办法去除)沉积吸附在柱头导致堵塞,可以尝试使用不同的溶剂(对此类物质有较好溶解性的)慢慢冲洗。

  如果是由于样品过滤不当或者样品在柱上析出导致某些颗粒杂质堵塞了,除了尝试寻找合适溶剂冲洗之外,只能考虑反冲了,通常,不建议反冲,因为可能对该产品造成较大损害,一定要慎用。做好样品的前处理并使用预柱或在线过滤器才是保护它的好办法。